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家畜口蹄疫(FMD)與豬傳染性水皰病是急性、熱性、高度接觸性的偶蹄類家畜傳染病，對人和動物危害嚴重，又可造成巨大經(jīng)濟損失。口蹄疫由于豬、牛、羊等主要家畜均可感染并能形成全球性大規(guī)模的流行，所以又被國際獸疫局(OIE)列為A類家畜傳染病之首。筆者認為，可從以下10個要點予以準確鑒別診斷。
1.病源體的結構與形態(tài)特征
1.1鼻病毒簇的口蹄疫病毒(FMDV)，是一種顆粒呈球形的微細核糖酸病毒。分為大小二種：大的直徑在20～30納米(一般為25納米)，這種顆粒具感染性；小的直徑在7納米，是大顆粒的亞單位，不具感染性。病毒的浮密度為1.38～1.42克/毫升，沉降系數(shù)為140S～150S。
1.2 豬水皰病病源為腸道病毒簇的水皰病毒(SVDV)，是略呈球形的小型病毒。主要成分為核糖核酸(RNA)。直徑25～30納米，外無套膜。浮密度為1.34～1.35克/毫升，沉降系數(shù)為154S。
2.病毒的型別
2.1口蹄疫病毒有歐洲型A、O、C；亞洲I型ASiai；南非I型SAT1、南非Ⅱ型SAT2、南非Ⅲ型SAT3七個血清型。
2.1.1血清型可根據(jù)核酸同源性大小分為二群，OAC和ASiai為第一群，SAT1、SAT2、SAT3為第二群。群內各同源性達60%～70%，但二群之間同源性僅為25%～40%，血清型間無血清交叉和交叉免疫現(xiàn)象。
2.1.2 二十世紀七十年代已發(fā)現(xiàn)62個亞型：A型29個，O型10個，C型4個，亞洲I型5個，非洲I型7個，非洲Ⅱ型3個，非洲Ⅲ型有4個。
2.1.3八十年代后對新亞型不再編號，已不再強調亞型的鑒定。
2.1.4各型和亞型的口蹄疫病毒，由于分子結構上的不同差異，其抗原性彼此不同，在外界環(huán)境的長期影響之下又會發(fā)生新的變異。各型之中以A型的毒力最強，O型次之。
2.2水皰病毒有型的差異。有的毒株毒性較差，僅蹄殼脫落不能行動，死亡率低。有的毒株毒性強，發(fā)生流產(chǎn)，死亡率可高達100%。
3.病毒的抗原性
3.1 口蹄疫病毒有三種抗原：
3.1.1第一種抗原，有感染力，為25納米大小的病毒顆粒所具有的抗原，其沉降系數(shù)為140S，這種抗原有型的特異性。
3.1.2第二種抗原，是病毒的蛋白質成分，即亞學位，是7納米的顆粒所具有的抗原，其沉降系數(shù)為12S，有型的特異性。
3.1.3第三種抗原，它不是病毒的成分，而是動物感染病毒后其組織內所發(fā)生的一種抗原，即與病毒感染有關的抗原(VIA抗原)，無型的特異性。
3.2水皰病毒與豬的腦脊髓炎病毒及豬的其它腸道病毒沒有血清學上的親緣關系。
4.病毒的組織培養(yǎng)
4.1牛的甲狀腺、牛腎、豬腎細胞的原代培養(yǎng)及豬腎的傳代細胞，BHK(金田鼠腎)細胞都對口蹄疫病毒有易感性，并能產(chǎn)生細胞病變。所以，這些細胞都能用于病毒的分離。由于病毒毒株不同，各種細胞的易感性也有差異。牛腎細胞在產(chǎn)生細胞病變后，有時會因未破壞細胞的增殖而得到恢復，外觀上不顯現(xiàn)細胞病變，不適用于診斷。 牛甲狀腺細胞對所有的野外毒株都有較大的易感性，接種24小時后可出現(xiàn)細胞病變。可適用于診斷。
4.2水皰病毒在哺乳豬的腎臟細胞和哺乳金田鼠的腎臟細胞上均可生長并產(chǎn)生細胞致病作用，使細胞變圓脫離，形成蝕斑，大片脫落，在致病細胞內，病毒呈晶格狀排列。
5.病毒對動物的易感性、傳染途徑與流行特點
5.1口蹄疫病毒以牛最易感染，尤其是黃牛、奶牛，其次是水牛、牦牛和豬、山羊、綿羊與駱駝等偶蹄類家畜，均可自然感染。
5.1.1有的毒株對牛特別易感，對豬不易感；對豬易感者對牛不易感。
5.1.2豚鼠不會自然感染，但接種口蹄疫病料后可產(chǎn)生原發(fā)性水皰和繼發(fā)性水皰。
5.1.3乳鼠對口蹄疫病毒的易感性比豚鼠大10～100倍。據(jù)實驗，用2～5日齡的乳鼠接種口蹄疫病料后，數(shù)日內出現(xiàn)痙攣性的麻痹、嘶啞等癥狀，最后導致死亡。有的鼠乳可見不典型癥狀即死亡。所以采用乳鼠接種法對口蹄疫診斷既經(jīng)濟又便捷。
5.1.4禽類可以人工感染口蹄疫。連續(xù)8次在野鴨的腳趾接種口蹄疫病毒，蹼上可出現(xiàn)水皰。1日齡雛雞用A型Ⅱ號病毒通過35代，O型病毒通過24代，C型病毒通過20代后，則雛雞砂囊及心臟出現(xiàn)病變癥狀。新孵出的雛雞采用肌肉接種多量的牛源O型病毒后，舌上可現(xiàn)水皰。
5.1.5傳染途徑主要是消化道粘膜及微小損傷的蹄冠、趾間，從皮膚侵入，但呼吸道 更易感染。冬、春季節(jié)發(fā)病率高，幾乎達到100%。病情急，傳播快，流行廣，夏秋季趨于緩和。
5.2水皰病毒對豬有很強的易感性，不論品種、年齡、性別。對牛、羊、馬、豚鼠均不感染。對1～3日齡乳鼠和吃奶的金田鼠均可通過人工感染。發(fā)病時乳鼠后肢麻痹，最后發(fā)生痙攣致死。死鼠的肌肉、內臟均帶毒。病豬及胴體、頭、蹄是本病的主要傳播來源。病豬的糞、尿及污染的飼養(yǎng)工具、運輸車輛、洗涮的污水以及接觸病豬的人都能起到傳播作用。傳染途徑主要是通過呼吸道、消化道、皮膚粘膜的創(chuàng)傷感染。無季節(jié)差異，一年四季均有發(fā)生，呈地方性流行。
6.病毒的帶毒部位及臨床癥狀特征
6.1口蹄疫病毒帶毒最多的部位是水皰皮、水皰液。其次為口腔流出的較為粘稠的唾液、分泌的乳汁、陰道的粘液、肌肉、內臟、淋巴結、脊髓、糞尿等均可以帶毒。
6.1.1病初口腔、上下齒齦、舌面、鼻鏡均出現(xiàn)原發(fā)性水皰，隨后體溫升高，蹄冠、趾間、蹄踵部的表皮潮紅、水腫，出現(xiàn)繼發(fā)性水皰。水皰皮薄，內含的透明液逐漸變混燭，水皰融合增大成片時動物食欲不振，精神萎頓，俯臥不起。
6.1.2水皰破裂形成爛斑，口腔齒齦、舌、趾間出現(xiàn)水皰糜爛時體溫趨于正常，走勢跛行。
6.1.3病牛有吸吮咂唇音，水皰破裂，露出鮮紅色爛斑，流出大量泡沫性口涎掛滿口角和上、下唇，拉成透明線狀，落至地面。患病期間，奶和肉分泌、生長停止。犢牛呈惡性病型者死亡率65%。
6.1.4病豬四蹄的蹄冠、趾間、踵及副蹄等部位均出現(xiàn)水皰，約有50%的病豬在鼻鏡、口腔粘膜上有豆狀水皰和爛斑，并有流誕現(xiàn)象。成年豬死亡率為3%，仔豬常因惡性病型發(fā)生嚴重的心肌炎(虎斑心)和急性腸胃炎，死亡率為60%左右。
6.1.5羊多為散發(fā)，口腔粘膜上發(fā)現(xiàn)水皰爛斑和彌漫性炎癥病變，山羊比綿羊更為明顯。主要癥狀在蹄部，50%以上為蹄型口蹄疫。
6.2水皰病豬體以蹄部和鼻鏡上的水皰皮與水皰液內含毒量最多。
6.2.1發(fā)病初期，血液、肌肉、內臟可帶毒。
6.2.2患病豬的淋巴結、骨髓、脊髓、糞、尿也可能帶毒。
6.2.3乳鼠、金田鼠因接種水皰病毒材料而發(fā)病死亡后的肌肉、內臟均發(fā)現(xiàn)有大量病毒。
6.2.4發(fā)病率20～100%。病初蹄冠、趾間、蹄踵的皮膚發(fā)紅、腫脹、疼痛，站立時頻頻舉蹄、跛行。隨后蹄踵出現(xiàn)大小不等的水皰，波及趾間、蹄冠。水皰皮內有淡黃、淡紅稍混濁的液體。
6.2.5有的僅1～2蹄有水皰，少數(shù)病例發(fā)現(xiàn)4蹄均有水皰，鼻鏡、口腔發(fā)生水皰占4%。
6.2.6體溫不高。嚴重病例局部化膿、壞死，蹄殼脫落，臥地不起，呈爬行狀，但精神、食欲正常，與患口蹄疫的病豬有明顯區(qū)別。
6.2.7發(fā)現(xiàn)個別病豬呈興奮癥狀，以頭觸地作轉圈運動。隨后發(fā)生輕癱、麻痹死亡的神經(jīng)癥狀的病例。
7.pH對病毒的影響
7.1采用組織培養(yǎng)口蹄疫病毒，以不同的pH溶液純組織培養(yǎng)液處理，得出滅活90%病毒所需要的時間：pH為7或7.5時病毒最穩(wěn)定，其感染力在持續(xù)5周的觀察中略微減低；pH為8和9時病毒滅活的速度分別為3周，每周減低90%；pH為6.5和10的樣品，其感染力為14 小時，減低90%；pH為6的樣品，其感染力每分鐘減低90%，然而約有百萬分之一的病毒顆粒至少60分鐘之內對滅活具有抵抗力；pH為 5的樣品，其感染力每秒鐘減低90%，約百萬分之一的病毒顆粒在30分鐘之內對滅活具有抵抗力；pH為2、3、4的三種酸化溶液中的病毒滅活太快，無法測定。在病豬體內(肌肉、內臟、淋巴結、骨髓等)的病毒由于受到組織細胞、組織液、蛋白質等保護因素的影響，用上述的pH值和時間的處理顯然不能達到滅活90%病毒的目的。
7.2水皰病毒既抗酸又抗堿。pH2.0～2.5時均不被滅活；pH2.0以下的酸性溶液或pH12.5的堿情溶液才能殺死病毒。
8.溫度對病毒的影響
8.1據(jù)試驗，使用純組織培養(yǎng)物，在不同的溫度處理后得出滅活90%的病毒所需的時間：61℃為0.5分鐘；55℃為2分鐘；49℃為1小時；43℃為7小時；37℃為21小時；20℃為11日；4℃為8周。由于受到組織、細胞、組織液、蛋白質等保護因素的影響，按上述溫度和時間處理，同樣也不能達到滅活90%病毒的目的。如在牛奶中的病毒當加溫到85℃、80℃、75℃、70℃時才會分別于1、3、15、30、分鐘內使其失去感染力。而在水皰皮內的病毒，即使在腐敗狀況下亦能存活較長時間。在糞池中也可保持39日，污水中可以保持感染力103日之久。牛舌上破裂的水皰皮內的病毒經(jīng)過61℃～63℃的巴氏消毒30分鐘后，仍然殘存具有感染力的病毒。
8.2水皰病病毒對高溫的抵抗力比較強。存在于死亡乳鼠體內的水包病毒，將其稀釋10倍的浸出液，需加溫至72℃1小時，才能全部殺滅。加溫至70℃時保持尚有百萬分之一的活毒殘存。50℃經(jīng)30分鐘仍有感染力。56℃30分鐘與80℃1分鐘可殺滅。
蹄部經(jīng)65℃～67℃、3～5分鐘燙毛后，水皰皮仍有感染性。1℃～2℃保存10日，病毒滴度未見降低。在豬糞、豬舍中可存留2個月。4℃的臟泥漿水中70日不會死亡。18℃～20℃保存病毒存活二年以上。
9.消毒劑對病毒的作用
9.1據(jù)試驗，2%～3%氫氧化納液、1%至2%的高錳酸鉀溶液、1%的甲醛溶液、0.5%的過氧乙酸溶液等消毒劑對口蹄疫病毒都有良好的消毒殺滅作用。
9.2水皰病毒對消毒劑抵抗力較強。10%生石灰乳、2%來蘇兒、5%漂白粉、20%草木灰水、03%次氯酸鈉液在0℃左右24小時尚不能使水皰皮中的病毒滅活。5%甲醛溶液在室溫中1.5%小時能使病毒滅活。10%甲醛溶液在室溫中1小時能使病毒完全滅活。含有0.5%有效氯的漂白粉溶液，在10℃至25℃環(huán)境下，經(jīng)30分鐘，能殺死病毒。存在死經(jīng)亡乳鼠體內的水皰病毒將其稀釋10倍、100倍、1000倍的浸出液，分別用1%、0.5%和0.2%的過氧乙酸消毒15分鐘，即可殺滅。
10.實驗室診斷的主要方法
10.1口蹄疫的實驗室診斷以乳鼠保護試驗與豚鼠接種試驗液為簡易可行。1～9日齡乳鼠接種試驗為陽性。也可采用補體結合反應試驗與瓊脂擴散沉淀試驗。還可采用交叉免疫法和補體結合反應結合起來，用于病毒亞型的鑒定。
10.2傳染性水皰病的實驗室診斷、乳鼠血清保護試驗是常用而有效的方法。1～9日齡的乳鼠接種試驗為陰性。也可采用血清中和試驗予以診斷。還有反向間接血凝實驗法診斷、補體結合試驗和免疫熒光試驗、放射免疫瓊脂雙擴散對流電脈病毒中和試驗診斷法。
