在畜牧業生產中,為減少豬病的發生和流行,除加強豬場的隔離消毒,減少環境中的病毒,還必須指定合理的免疫程序,使得豬體內長期保持抵抗豬病強毒攻擊的有效抗體,而要了解豬體內的有效抗體水平,就必須開展豬病免疫抗體水平監測。目前國內對豬病抗體水平檢測方法很多,如ELISA檢測法、DOT-ELISA檢測法和間接血凝法等,這些檢測方法雖然具有微量、特異的優點,但需要條件較好、設備齊全的實驗室,對操作人員要求專業性高,而且檢測程序繁瑣,一次檢測至少需要6個小時。不適合于缺少儀器設備和專門技術人員的基層獸醫站、養豬場的使用。
近年來,隨著膠體金免疫層析技術及生化制備技術的發展,在人醫上用膠體金免疫層析法檢測血清中各種抗體已成為現實。目前,“豬病(豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、豬偽狂犬病毒、豬口蹄疫病毒、圓環病毒)抗體免疫金標快速檢測卡”就可以在很短的時間內檢測出豬只接種豬病(如豬瘟)疫苗后,豬體是否產生有效抗體、為當前最新檢測手段,且該方法操作簡便,不需要任何儀器設備及復雜的樣品處理,檢測一個樣品只需15-20min,結果顯示直觀,重復性好,容易判定,非常適應基層獸醫站、獸醫門診和各養豬場開展疫病的監測及區域性疫病普查。
豬病(如豬瘟)抗體免疫金標檢測卡由加樣區和檢測區組成,在加樣區內,加入3-5 滴(50—100µl)血液或血清樣品,把試紙板平放于桌面上,在室溫下靜置20min,便可觀察結果。當檢測區內(T)出現一條顏色較深的紫紅色線,說明豬病(如豬瘟)抗體滴度較高,不需要及時接種豬病(如豬瘟)疫苗;如果在檢測區(T)線區出現一條顏色很淺的紫紅色線,說明豬病(如豬瘟)抗體為最低保護滴度,這是接種豬病疫苗的最佳時間;當檢測區(T)線無紫紅色線出現,說明豬病(如豬瘟)抗體低于最低保護滴度,這時應當觀察豬群健康狀況,如果豬群健康時,應當立即進行疫苗接種;如果豬群中已經有個別豬只出現疑似豬病(如豬瘟)時,則可以作為豬病(如豬瘟)診斷的一個依據。
鑒于豬病(如豬瘟)抗體免疫金標試卡具有簡便、準確、快速和容易判定的特點,就能為一些基層獸醫站和養豬場檢測豬病(如豬瘟)抗體提供非常好的條件。根據我們的實際經驗,我們以豬瘟抗體檢測卡為例說明,在以下幾種情況下使用豬病(如豬瘟)金標檢測試卡,對指導豬病(如豬瘟)免疫和建立適宜的免疫程序,可以收到很好的效果。
1. 可用于檢驗豬瘟疫苗的質量和確定免疫的最適劑量
如養豬專業戶或大型養豬場購買大批量的豬瘟疫苗放在自己場里的冰箱凍結層內,每次最好購買同一批號(一般以生產日期定批號)的豬瘟疫苗。可以從中取出一瓶疫苗,選擇不同日齡的乳豬,小豬,種豬若干頭,分別應用2頭份,3頭份,4頭份,5頭份豬瘟疫苗進行免疫接種,免疫15天后采血,用抗體免疫金標檢測卡測定抗體滴度,如果各組都能產生抵制豬病強毒攻擊的免疫抗體時,則可以從中選擇免疫頭份少,抗體滴度高作為本批號疫苗最佳免疫劑量。如果檢測的豬瘟抗體達不到強毒攻擊的最低保護抗體時,則應當檢查是否是疫苗本身問題,還是豬群存在有免疫抑制病毒(如園環病毒)等的干擾。這時可以采取更換該廠家不同批號的豬瘟疫苗或另選廠家的豬瘟疫苗,再按上述方法進行不同劑量免疫,來確定是否是該批疫苗失效或是免疫抑制病毒的干擾,判定適宜的免疫劑量。
2. 在母豬分娩時
當母豬分娩時,用豬瘟抗體免疫金標試檢測卡檢測母豬的抗體水平.檢測結果:如果在試紙條上只出現一條色線(C質控線),說明母豬體內的豬瘟抗體滴度已低于抵抗豬瘟強毒攻擊的最低保護抗體,母豬應當及時進行豬瘟疫苗接種,同時乳豬應當及時采用超前免疫,以免發生豬瘟病。如果母豬檢測出現二條色線,說明體內的豬瘟抗體滴度較高,可以抵抗豬瘟強毒的攻擊,就不需要進行超前免疫,因為母豬可以通過初乳把豬瘟抗體垂直帶給仔豬。這時仔豬可以按照正常的免疫程序進行預防注射。
3. 當無法判斷有無豬瘟時使用
當從外地,尤其是從外地區或外省購進大批量的小豬種或種豬時,飼養主自己無法了解購買的小豬是否進行過豬瘟疫苗免疫或者免疫是否有效。為了防止豬瘟病發生,選擇什么時間再進行豬瘟免疫最適宜時,則可以根據不同地區,不同日齡的豬只,選擇有代表性的豬只采血,應用豬瘟抗體免疫金標檢測卡進行快速檢測,通過檢測結果,可以了解整個豬群豬瘟抗體的狀況來決定是否及時開展免疫及選擇適宜的免疫劑量,這樣可以大大的避免豬瘟病的發生。
4. 在懷疑發生豬瘟病時使用
可以采集病豬血液(血清)用豬瘟金標檢測卡檢測,如果是發生豬瘟病時,豬體血液中沒有豬瘟抗體或抗體滴度很低。當然,發生豬瘟而耐過不死的豬只,抗體滴度可能會很高。
5. 在發生豬瘟后使用
進行疫病監測時,可應用抗體金標檢測卡進行快速檢測。如豬場發生豬瘟病時,常規的處理程序是全面隔離消毒和緊急預防注射。此時豬群特別是種豬場的豬群的抗體滴度差異很大,當緊急預防注射后的抗體滴度水平又會出現明顯的差異,因此,還應了解豬群豬瘟抗體水平,制定合理的免疫程序尤為重要。