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湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物保健工程技術(shù)研究中心是由湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院、長(zhǎng)沙綠葉生物科技有限公司、長(zhǎng)沙樹(shù)人牧業(yè)科技有限公司聯(lián)合組建的產(chǎn)學(xué)研合作科研平臺(tái)。中心聘請(qǐng)湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)袁慧教授等10多名資深專(zhuān)家擔(dān)任高級(jí)顧問(wèn)，青年學(xué)者文利新博士擔(dān)任中心主任，中心擁有一批年輕的博士和碩士等組成的研發(fā)隊(duì)伍，主要從事動(dòng)物保健理論、動(dòng)物亞健康調(diào)控、功能性飼料和功能性畜產(chǎn)品的研究和開(kāi)發(fā)。其主要為豬場(chǎng)提供免疫監(jiān)測(cè)、免疫程序制定的咨詢(xún)等服務(wù)，免疫增強(qiáng)和調(diào)節(jié)劑以及抗免疫應(yīng)激劑的產(chǎn)業(yè)化和免疫保健技術(shù)的推廣，為養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展保架護(hù)航。
湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物保健工程技術(shù)研究中心提供檢測(cè)項(xiàng)目：豬瘟、偽狂、藍(lán)耳、圓環(huán)和口蹄疫等抗體檢測(cè)。
為了使廣大養(yǎng)殖朋友更好的對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行疾病控制，我們制定一份病料采集方法注意事項(xiàng)，供廣大養(yǎng)殖朋友參考。
采集病料前需要進(jìn)行器械的滅菌消毒，使用一次性針頭和注射器及真空采血管；采取一種病料，使用一套器械與容器；做好計(jì)劃，如要采集足夠的數(shù)量及采集的部位、種類(lèi)等；還要準(zhǔn)備采集后的用具等消毒、清洗液及容器等用品。
具體步驟如下：
1 準(zhǔn)備好滅菌（至少是干凈的，但必須保證干燥）干燥的帶蓋子的塑料試管或者青霉素瓶若干；準(zhǔn)備好專(zhuān)業(yè)的采血針，或者一次性注射器（5-10毫升）。保證每個(gè)血樣一個(gè)瓶子或一個(gè)針筒。
2 采血。采血前，在相應(yīng)的注射器或容器上做好標(biāo)記。
（1）耳靜脈采血。本法為最常用的取血法之一（適用于中、大豬）。將豬保定后，或由助手以手扶住頭部及耳部。選耳靜脈清晰的耳朵，用75%酒精局部消毒，待干。用手指輕輕摩擦豬耳，使靜脈擴(kuò)張，用連有針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管,等血液漏出取血或?qū)⑨橆^逆血流方向刺入耳緣靜脈取血，取血完畢用棉球壓迫止血。黑色皮膚豬耳靜脈看不清，用手電筒在耳、腹面照射利于采血。
（2）前腔靜脈采血（適用于仔豬，小豬）：豬前腔靜脈，在第一對(duì)肋骨間的胸腔入口處的氣管腹側(cè)面，由左右兩側(cè)頸靜脈和腋靜脈匯合形成。該血管在一周齡豬直徑約5毫米，成年豬約1厘米以上。采血部位在第一對(duì)肋骨與胸骨柄結(jié)合處直前，但由于左側(cè)靠近隔神經(jīng)，以右側(cè)采血為宜。
（3） 注意事項(xiàng)：
選用合適的注射器及針頭
公母豬宜選用16號(hào) 50mm針頭；30kg以上的中大豬，宜選用12號(hào) 38mm針頭；10-30kg小豬，可選用9號(hào) 25mm(一次性注射器常配的針頭)；10kg以下仔豬，應(yīng)選擇9號(hào) 20mm針頭(一次性注射器所配的另一種規(guī)格的針頭)。
選準(zhǔn)進(jìn)針的部位
一般來(lái)說(shuō)，30千克以下的小豬應(yīng)采兩前肢與氣管交匯處，種公母豬和30千克以上的中大豬可選頸部最低凹處。進(jìn)針時(shí)又要掌握好一定的方向、角度和深度，要及時(shí)調(diào)整。血管被刺穿，會(huì)引起血腫，要立即停止采血，須換另一頭豬采血。特別要注意的是對(duì)仔豬采血時(shí)，不能太猛、太深，以免傷及心包或心臟。
特別指出，血液和血清是不同的概念！血清是血液的組成部分，它必須從血液中分離出來(lái)后，才能用于血清學(xué)試驗(yàn)，但是這種分離過(guò)程需要專(zhuān)業(yè)人員來(lái)操作。因此，采集的血樣，最好在凝固后，直接送到檢測(cè)單位，以保證血清學(xué)試驗(yàn)的正確進(jìn)行。一般采血2～5毫升就足以滿足實(shí)驗(yàn)室診斷的用量了。重點(diǎn)提示，用于血清學(xué)試驗(yàn)的血樣，不能加任何抗凝血?jiǎng)?/p>
3 血液保存：將采完血樣的注射器活塞，微微拔出一些，使針筒內(nèi)留有部分空氣，然后蓋好針頭蓋子，將注射器針頭向上成30度角，斜放，等待血液完全凝固（大約10～30分鐘），此過(guò)程中不能移動(dòng)注射器，防止溶血。用真空采血器采集的血樣，直接傾斜放置好。夏天在常溫下放置一段時(shí)間，冬天要放置在25～37℃溫水中一段時(shí)間，以利于血液中血清的析出。血樣送檢時(shí)，在保溫箱加適量的冰塊防止血液變質(zhì)，送檢過(guò)程中盡量防止劇烈振蕩。
注意事項(xiàng)：（1）擦拭采血部位的酒精未干，不要立即采血。血液混進(jìn)酒精后易 造成溶血（使檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)）；
（2）血液在運(yùn)輸過(guò)程中，防止坐摩托車(chē)、拖拉機(jī)等劇烈展蕩，使血細(xì)胞破裂引起溶血（要注意血液防震）
（3）血液存放的容器要洗凈，確保干燥。
疑似豬瘟的病料采集：
1 放血。先把豬放血處死，在從大腿內(nèi)側(cè)將皮膚、肌肉切開(kāi)。
2 解剖摘取扁桃體。從胸部中線偏右處，切斷肋骨，打開(kāi)胸腔，在氣管與肺臟連接處向前5～10厘米位置，割斷氣管，并順著氣管向前割開(kāi)，直至咽喉部，從后向前將氣管割斷一半，這時(shí)就可以在舌跟靠近上腭的左右兩邊看到兩個(gè)淋巴結(jié)，即扁桃體。小心取下扁桃體放置于干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。
3 解剖摘取肺門(mén)淋巴結(jié)。一只手握住氣管切斷處，使勁向外拉出肺臟，另一只手幫忙扯斷肺臟與身體的連接，并將整個(gè)肺臟翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，使背面向上，此時(shí)可在氣管分為支氣管，與肺臟連接處，找到分別位于左右兩側(cè)的兩個(gè)肺門(mén)淋巴結(jié)，小心摘取，放置于另一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。
4 肺臟樣品的采集。如有必要，此時(shí)可將割取部分肺臟樣品，一般只要割取介于病變和正常組織之間的部分，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記，當(dāng)然也可以將整個(gè)肺臟保存。
5 解剖摘取腹股溝淋巴結(jié)。將兩個(gè)后腿，向下向外壓，就可以在兩側(cè)凹陷的腹股溝處中間部位，看到微微或明顯隆起，即腹股溝淋巴結(jié)，小心割開(kāi)皮膚和淋巴結(jié)表面的被膜，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。
6 解剖摘取脾臟。沿腹中線將腹部皮膚、肌肉和腹膜，小心切開(kāi)并打開(kāi)腹腔，在腹腔的左側(cè)位于胃和回腸下面，找到脾臟，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。
7 解剖摘取腸系膜淋巴結(jié)。從腹腔的右側(cè)位于肝臟和胃下面，找到腸系膜，在腸系膜靠近腸道的末端，可以看到很多結(jié)節(jié)，即腸系膜淋巴結(jié)，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。
8 流產(chǎn)胎兒。通常木乃伊胎不能作為檢測(cè)樣品。對(duì)于新鮮流產(chǎn)的胎兒，可作為檢測(cè)樣品。對(duì)于流產(chǎn)日齡較早的胎兒，可取整個(gè)胎兒保存；如果是晚期流產(chǎn)的胎兒，最好根據(jù)上述步驟，摘取相應(yīng)組織，保存送檢。胎兒的保存方法同上。
疑似藍(lán)耳病病例的病料采集：
具體病料采集程序與豬瘟病料的采集基本一致（包括步驟1、3至6、8），需要強(qiáng)調(diào)的是，在藍(lán)耳病的檢測(cè)中，必須包括淋巴結(jié)和肺臟樣本！如果是檢測(cè)流產(chǎn)胎兒，那么，最好能剪取部分胎衣液或剪取胎衣樣本，保存方法同上。
疑似圓環(huán)病毒感染病例的病料采集：
對(duì)于疑似圓環(huán)病毒感染的病例，病料采集包括步驟1、3至7。記住，在圓環(huán)病毒的檢測(cè)中，必須包括淋巴結(jié)樣品。
疑似偽狂犬病病例的病料采集：
偽狂犬病病毒可危害呼吸系統(tǒng)、繁殖系統(tǒng)或中樞神經(jīng)系統(tǒng)，因此，病料采集包括步驟1至8。同時(shí)，最好能夠采集神經(jīng)系統(tǒng)的樣品。具體步驟為用手手術(shù)刀片將豬的頭皮剝?nèi)ィ冻鲱^蓋骨，然后用鑿子（也可可用一字螺絲刀），輕輕鑿開(kāi)頭蓋骨，并清理骨頭碎片，等整個(gè)大腦露出后，小心用手摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。特別提示，因?yàn)楝F(xiàn)在用的偽狂犬病疫苗絕大多數(shù)都是基因缺失疫苗，因此還需進(jìn)行血清學(xué)抗體的檢測(cè)。
疑似乙型腦炎病例的病料采集：
病料采集包括步驟1、5、8。注意，乙型腦炎病毒可感染人類(lèi)，特別是兒童，導(dǎo)致嚴(yán)重的腦炎，因此取病料時(shí)，請(qǐng)務(wù)必帶上乳膠手套，并小心操作。
疑似傳染性胃腸炎和流行性腹瀉病例的病料采集：
本病的病料采集，包括步驟1、5、7。同時(shí)需要采集腸道樣品。從腹腔中剪取病變的小腸10～15厘米，從一側(cè)將腸道剪開(kāi)，輕輕刮去腸道內(nèi)容物，然后放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。
疑似流感病例的病料采集：
按照上述方法采集肺臟和淋巴結(jié)即可。
檢測(cè)病料的運(yùn)輸注意事項(xiàng)：
死亡的豬應(yīng)盡快采集，夏天不應(yīng)超過(guò)2小時(shí)，冬天不超過(guò)6小時(shí)（還要視具體溫度）。采集豬的病料必須新鮮，盡可能減少污染。用于檢驗(yàn)的內(nèi)臟組織塊不必太大。無(wú)論是運(yùn)送新鮮的病料還是冰凍的病料，保證整個(gè)過(guò)程中，病料始終處于低溫狀態(tài)，十分重要。一個(gè)簡(jiǎn)單的方法是，用廢棄的礦泉水瓶，灌水后，放置在冰箱中，制備冰塊，在病料運(yùn)輸時(shí)，將足量的冰塊和病料一起放置在泡沫箱中，用冰塊包裹所有病料，如果冰塊不夠多，最好將冰塊放置在病料的上面和下面。密封后，快速運(yùn)送到檢測(cè)單位。送檢過(guò)程中要防止傾倒、破碎、避免樣品泄漏，要注意有的樣品不能劇烈展蕩，要注意緩沖放置，所有樣品都要貼上能標(biāo)示采樣豬的詳細(xì)標(biāo)簽。
注意事項(xiàng)：1 病料要新鮮 必須是選取新鮮及有病變部位的材料
2 取材要有代表性 對(duì)每一器官，應(yīng)在各個(gè)不同部位多取幾塊組織，并且病變部分應(yīng)盡量附帶一些周?chē)慕】到M織。
豬前腔靜脈采血圖：
豬耳靜脈采血圖片：
